O gradual crescimento da população, junto com a cultura de não reaproveitamento dos resíduos descartados e o desenvolvimento de práticas não sustentáveis tem gerado impactos ambientais, principalmente pelo descarte incorreto destes resíduos no ambiente e a utilização de energias não renováveis. Tendo em vista o meio ambiente e o esgotamento dessas fontes de energia, se buscam fontes alternativas, dentre elas os biocombustíveis. O biodiesel está entre as mais importantes alternativas energéticas consideradas para substituir combustíveis derivados do petróleo. Entretanto, durante o processo ocorre a formação de glicerina, um subproduto tóxico e contaminante, com uma produção média de 10% do total, elevando o custo da produção do biodiesel para o tratamento da glicerina. Para possibilitar um processo sustentável do biodiesel, se utiliza bactérias biotransformadoras presentes na própria glicerina para transformarem esse subproduto em produtos de melhor valor de mercado e não tóxicos, como o etanol e o 1,3-propanodiol. O presente trabalho teve como objetivo geral o isolamento de bactérias capazes de utilizar glicerina como fonte de carbono. Como objetivos específicos se teve a realização de análises macroscópicas e microscópicas dos isolados e a identificação dos isolados pela amplificação do rRNA 16S. Para a metodologia foram feitos meios líquidos e sólidos com concentrações de 5% e 2% de glicerina. As condições para o crescimento foram com temperatura de 37ºC por 7 dias. Após o plaqueamento em meios sólidos concentrados e também em diluição seriada, foram realizadas análises macroscópicas das bactérias isoladas e depois análises microscópicas como o teste Gram. Posteriormente foi realizada a extração de DNA e à amplificação por PCR. Com os resultados obtidos sugere-se o isolamento de um tipo de bactéria classificada como gram positiva, bacilos. Ambas as concentrações de meio possibilitaram ótimo crescimento, e foi possível extrair o DNA, porém não foi possível à amplificação.